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什么是中壓層析柱

更新時間:2024-06-07      點(diǎn)擊次數(shù):2179

  中壓層析(MPLC)是一種介于常規(guī)層析和高效液相色譜(HPLC)之間的分離技術(shù)。相對于常規(guī)層析,MPLC有更高的分離效率和純度,但比HPLC更簡單易用,并且可以應(yīng)用于較大量的樣品。

  中壓層析柱是中壓層析技術(shù)中的核心設(shè)備。它與常規(guī)的層析柱相似,但可以承受較高的壓力,通常為1-10 bar。中壓層析柱的質(zhì)量和設(shè)計對于分離效率很重要。它需要具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性、低死區(qū)容積、均勻的顆粒分布和尺寸,以及適當(dāng)?shù)闹L度和直徑,以滿足特定的分離需求。

  中壓層析柱可以用于分離各種不同類型的化合物,包括有機(jī)分子、多肽、蛋白質(zhì)、核酸和其他生物大分子。其優(yōu)點(diǎn)包括分離效率高、選擇性好、操作簡單、建設(shè)成本低廉等特點(diǎn)。同時,中壓層析柱還可以應(yīng)用于大量生產(chǎn)中的制備和純化工藝,以及生物醫(yī)學(xué)和制藥領(lǐng)域的研究和開發(fā)。

  應(yīng)用領(lǐng)域:

  1. 生物制藥學(xué)

  中壓層析柱被廣泛應(yīng)用于生物制藥學(xué)中的分離和純化過程中,例如分離和純化重組蛋白質(zhì)、抗體、基因表達(dá)產(chǎn)物等。它可以實(shí)現(xiàn)高純度的生物制品,且不會對生物分子的結(jié)構(gòu)和活性產(chǎn)生影響。

  2. 食品和飲料科學(xué)

  產(chǎn)品可以用于食品和飲料科學(xué)領(lǐng)域中的分離和檢測,例如提取和分離天然色素、香料、抗氧化劑等。它可以更準(zhǔn)確地確定和量化食品和飲料中的化學(xué)成分,以及在食品和飲料的質(zhì)量控制和研發(fā)中使用。

  3. 醫(yī)藥化學(xué)和天然藥物學(xué)

  產(chǎn)品可以用于醫(yī)藥化學(xué)和天然藥物學(xué)的分離和純化,例如提取和分離活性成分、化合物和天然藥物的生物堿、皂苷等。它也可以用于研究植物藥物和傳統(tǒng)草藥的成分和組成,以及新藥物的研發(fā)。

 

  中壓層析柱適用于分子篩、離子交換、凝膠滲透與親和層析。隨著液相層析法進(jìn)入血液制品生產(chǎn),利用層析法,可純化血漿中多種蛋白,例如白蛋白等等。越來越多生產(chǎn)單位相繼使用,效果好,甚為滿意。

  配套的層析柱轉(zhuǎn)換接頭,結(jié)構(gòu)合理,使用方便,能保護(hù)凝膠面不受液流的破壞,層析流動分布均勻和分辨率高等優(yōu)點(diǎn)。轉(zhuǎn)換接頭根據(jù)實(shí)驗需要,可調(diào)節(jié)長短150mm左右,特殊長短可另行定制。

  層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。

  此外, 直徑加大,洗脫液體體積增大,樣品稀釋度大。分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度,分離度與柱高的平方根相關(guān),但由于軟凝膠柱過高擠壓變形阻塞,一般不超過1米。

  分族分離時用短柱,一般凝膠柱長20-30厘米,柱高與直徑的比較5:1─10:1,凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍。

  分級分離時柱高與直徑之線為20:1─100:1,常用凝膠柱有50×25厘米,10×25厘米。層析柱濾板下的死體積應(yīng)盡可能的小,如果支掌濾板下的死體積大,被分離組分之間重新混合的可能性就大,其結(jié)果是影響洗脫峰形,出現(xiàn)拖尾出象,降低分辯力。在分離時,死體積不能超過總床體積的1/1000。

  中壓層析柱是一種重要的分離和純化工具,廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、制藥、食品和飲料、醫(yī)藥化學(xué)和天然藥物學(xué)等眾多領(lǐng)域中。隨著分析技術(shù)的不斷發(fā)展,中壓層析柱也將繼續(xù)發(fā)展和應(yīng)用于更廣泛的領(lǐng)域。

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