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有機酸分析柱詳細使用說明

更新時間:2016-08-16      點擊次數(shù):1937
   作為有機酸分析柱的廠家,我們擁有豐富的產(chǎn)品經(jīng)驗,下面給大家介紹下有機酸分析柱的詳細使用說明,希望可以給客戶一些借鑒參考。

  有機酸分析柱填充的是聚合物材料,需要特殊的維護。向柱內(nèi)導入以下介紹了的以外的有機溶劑會導致聚合物材料膨脹和過度增壓。因此,你應(yīng)當在安裝柱子以前,先用異丙醇,然后用0.1N的硫酸十分*地沖洗管路以*去除有機溶劑。

  在使用這個有機酸分析柱之前,我們建議客戶應(yīng)熟讀有機酸分析柱的使用說明。

  有機酸分析柱填充有氫形式的陽離子排斥樹脂,特別開發(fā)用于在低牙條件下分離包括酒、果汁、奶制品、生物樣品、工業(yè)原料和環(huán)境樣品中的有機酸。

  一、洗脫

  推薦使用濃度范圍在0.002到0.05N的稀硫酸溶液。大多數(shù)的分析使用0.01N的硫酸(pH=±2.3)都可以獲得成功。其他的強酸例如磷酸和高氯酸也可以使用,但是鹵酸例如鹽酸不推薦使用,因為它們會腐蝕不銹鋼。

  當有強酸用于柱子的洗脫液的時候,柱子就進行了自身再生。所以,特別的再生步驟是不需要的。但是這樣并不能直接對洗提強度和大多數(shù)有機酸的保留性質(zhì)進行校正,較強的洗提強度通常只減少zui后餾出的化合物的保留時間。

  在使用以前,所有的洗脫液都要用0.45μm濾膜過濾和脫氣。對于這個有機酸分析柱,使用有機相修正,例如乙腈(zui大20%),可以縮短保留時間。這樣做,總是會造成背壓的升高。所以,較高的操作溫度和較低的洗提流速通常可用于防止產(chǎn)生過高壓力。

  注意,一旦對柱子使用了有機相修正,柱子就會保留使用了有機相修正的洗脫液的色譜特性,即使洗脫液已經(jīng)恢復(fù)到原始的100%的水相,柱子的性質(zhì)也不會回到當初發(fā)貨時的狀態(tài)了。

  因此,如果你的應(yīng)用中包括有芳香酸或不飽和酸,它們會出現(xiàn)較長的保留時間,我們推薦使用芳香酸柱(Cat.no.28352),它是專門設(shè)計用于此類化合物的。

  二、流量和壓力

  推薦用于有機酸分析柱的流量是0.3-0.8ml/min。任何情況下洗脫流量都不能超過0.8 ml/min,記住柱子壓力產(chǎn)生的原因有洗脫流速,柱溫,洗脫液的黏度等等。

  要限制洗提流速,使泵壓力不超過2200PSI。在45°C,0.6ml/min流速時,預(yù)期的壓力應(yīng)當在600-1500 PSI之間。如果在此條件下,柱壓超過了1200 PSI,通常指示有污染物沉積在填充材料上,必須采取改正的措施。

  三、樣品準備

  保持柱子長壽的關(guān)鍵是進樣前適當?shù)牡臉悠诽幚怼D惚仨毞乐箤⒅?,油脂,蛋白質(zhì)物質(zhì)和重金屬離子導入色譜柱,不管是流動相還是樣品。特別地,要禁止導入顆粒雜質(zhì)。這些zui終都會造成操作壓力的增高而且非常困難或者不可能去除。

  生物樣品在注射以前必須除去蛋白質(zhì)。較好的除蛋白試劑是磺基水楊酸。

  通常使用的樣品量在10-50微升的范圍內(nèi),但是進樣高達100微升應(yīng)當沒有問題。進樣500微升或者更多可能會導致峰變寬或者融合。

  四、柱前過濾器

  柱前過濾器含有0.5-2.0um的多孔不銹鋼燒結(jié)物,安裝在樣品注射器和柱子之間用于從洗脫液中去除顆粒物。這樣可以防止分析柱產(chǎn)生壓力增高的問題,延長柱子的壽命。當有保護柱的時候,柱前過濾器就可以不用了。

  五、保護柱

  保護柱應(yīng)當用在這個柱上,因為樣品和洗脫液污染可能會造成柱壓力的增高。樣品中諸如鹽和蛋白質(zhì)類的污染物可能會使柱效降低,在注射進柱子以前應(yīng)當去除。

  六、溫度

  有機酸分析柱可以在20-90°C使用,提高柱溫會改善柱效。然而,柱溫也會樣品的保留,所以建議使用柱溫箱以保證得到可以重復(fù)的結(jié)果。

  由于某些分離對溫度非常敏感,所以有必要仔細地操控溫度以優(yōu)化分離效果。如果在室溫使用這個柱子,洗脫流速必須降低保持泵壓不高于2200PSI。

  七、貯存

  有機酸分析柱提供給你的時候使用0.01N的硫酸作為平衡。這也是建議的用于貯存的洗脫液。柱子在保存的時候,一定要使用提供的螺絲和墊圈將端口密封。色譜柱必須以這種方式使用和保存,在任何時候都要保證不使柱床干涸。不正確的貯存(沒有密封)或不正確的使用,會導致填充材料部分地干涸,會發(fā)生高的柱壓。在這種情形下,可以倒轉(zhuǎn)柱子,要以0.1ml/min的流速在90°C向柱子泵入0.01N的硫酸。

  以上是關(guān)于有機酸分析柱的詳細使用說明,更多內(nèi)容咨詢上海宸喬生物科技有限公司。

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